需自備的儀器和用品：

高效液相色譜儀、示差折光檢測器、低速離心機(jī)、溶劑抽濾裝置、超聲波清洗器、針頭式過濾器（水系，50個(gè)，0.22μm）、濾膜（水系1個(gè)，0.45μm）、

鈣柱（Carbomix Ca-NP10，7.8 ×300 mm）、可調(diào)式移液器、樣品瓶（50個(gè)，2mL）、超純水。

優(yōu)點(diǎn)如下：

1、快速簡便：操作時(shí)間短，48-50T，可測40例樣本左右，96-100T,可測80例樣本左右；

2、取樣量微：常規(guī)操作取樣量50l， 酶標(biāo)儀操作僅需5l即可檢測，部分試劑盒取樣多少請(qǐng)；

3、穩(wěn)定性好：試劑盒2～8℃存放3個(gè)月有效；

4、再現(xiàn)性好：20倍稀釋線性仍然良好；

5、回收試驗(yàn)： X =99%；

6、受外界影響因素?。焊蓴_因素少，重復(fù)性強(qiáng)；

7、測試面廣：可測動(dòng)物血清(漿)、組織、各種體液、灌流液、各種培養(yǎng)細(xì)胞以及細(xì)胞培養(yǎng)上清液等，部分試劑盒適用于檢測植物。

測定步驟：

1.加樣

1. 除包被外都需45度加樣

2.加樣體積要準(zhǔn)確

3.管底加樣，不能加在管壁上

4.加樣時(shí)不能產(chǎn)生氣泡

2.溫浴

1.加標(biāo)本后和加結(jié)合物后，應(yīng)立即放入按規(guī)定的反應(yīng)溫 度的水浴箱。

2.各ELISA板不應(yīng)疊在一起。

3.為避免蒸發(fā)，板上應(yīng)加蓋，或?qū)迤椒旁诘撞繅|有濕 紗布的金屬濕盒中。

4.加入底物后，反應(yīng)的時(shí)間和溫度通常不做嚴(yán)格要求。 如室溫高于20℃，ELISA板可避光放在實(shí)驗(yàn)臺(tái)上，以便 不時(shí)觀察，待對(duì)照管顯色適當(dāng)時(shí)，即可終止酶反應(yīng)。

3.洗滌

1.洗滌在ELISA過程中不是反應(yīng)步驟，但卻 是決定實(shí)驗(yàn)成敗的關(guān)鍵。

2.目的是洗去反應(yīng)液中沒有與固相抗原或 抗體結(jié)合的物質(zhì)以及在反應(yīng)過程中非特 異性吸附于固相載體的干擾物質(zhì)。

4.讀板

1.陰性對(duì)照顏色極淺，在定性測定中一般 可采用目視比色。

2.如用酶標(biāo)儀測定結(jié)果，準(zhǔn)確性決定于 ELISA板底的平整與透明度、酶標(biāo)儀的質(zhì) 量和軟件的算法。

優(yōu)點(diǎn)如下：

1、快速簡便：全程約50分鐘，可測100例左右樣本。

2、取樣量微：本法取手指或耳垂等末梢血20ul～50ul即可測紅細(xì)胞中的SOD，只需2ml靜脈血可測白細(xì)胞中的SOD及血小板中SOD，只需50mg左右組織就可測組織勻漿、胞漿中的SOD，0.2g組織可測線粒體及微粒體中的SOD。

3、靈敏度高：IC50=0.05g/ml，是鄰苯三酚法的18倍。

4、穩(wěn)定性好：試劑盒2～8℃存放6個(gè)月有效。

5、再現(xiàn)性好：變異系數(shù)CV=1.7%。

6、回收試驗(yàn)： X =103.3%。

7、受外界影響因素?。焊蓴_因素少，重復(fù)性強(qiáng)。

8、測試面廣：可測動(dòng)物血液、組織、各種體液、灌流液等、各種培養(yǎng)細(xì)胞、植物組織、各種水產(chǎn)以及化妝品、保健品等，效果均佳。

沙氏葡萄糖瓊脂培養(yǎng)基 Sabouraud’s Glucose Agar Medium 250g　人腺苷脫氨酶(Adenosine deaminase)ELISA試劑盒 0.312-20 ng/mL

沙氏葡萄糖液體培養(yǎng)基 Sabouraud’s Glucose Broth Medium 250g　ELISA Kit for Human Adenosine deaminase 0.312-20 ng/mL

膽鹽硫乳瓊脂培養(yǎng)基  250g　人花生四烯酸5脂加氧酶（5-lipoxygenase）ELISA試劑盒 0.156-10 ng/mL

碘液  2ml*20支　ELISA Kit for Human Arachidonate 5-lipoxygenase 0.156-10 ng/mL

0.1%煌綠  1ml*20　人花生四烯酸-15-脂加氧酶B(ALOX15B)ELISA試劑盒 0.39-25 ng/mL

甘露醇氯化鈉瓊脂培養(yǎng)基 Mannitol Salt Agar Medium 250g　ELISA Kit for Human Arachidonate 15-lipoxygenase B 0.39-25 ng/mL

RV沙門增液體培養(yǎng)基（2015藥典） RV Salmonella Enrichment Medium 250g　人擴(kuò)張性共濟(jì)失調(diào)突變基因(ATM)ELISA試劑盒 0.156-10 ng/mL

紫紅膽鹽葡萄糖瓊脂培養(yǎng)基（2015藥典） Violet Red Bile Glucose Agar 250g　ELISA Kit for Human Serine-protein kinase ATM 0.156-10 ng/mL

腸道增液體培養(yǎng)基（2015藥典）  250g　人垂體腺苷酸環(huán)化酶激活肽（ PACAP）ELISA試劑盒 0.78-50 ng/mL

沙門、志賀屬瓊脂培養(yǎng)基（SS） Salmonella-Shigella 250g　ELISA Kit for Human Pituitary adenylate cyclase-activating polypeptide 0.78-50 ng/mL

麥康凱瓊脂培養(yǎng)基（MacC） Maconkey Agar Medium 250g　人腺苷酸環(huán)化酶10(ADCY10)ELISA試劑盒 15.6-1000 pg/mL

麥康凱瓊脂培養(yǎng)基（2015藥典） Maconkey Agar 250g　ELISA Kit for Human Adenylate cyclase type 10 15.6-1000 pg/mL

甘露醇氯化鈉瓊脂培養(yǎng)基(2015藥典) Mannitol Salt Agar 250g　人腺苷酸環(huán)化酶1(ADCY1)ELISA試劑盒 0.156-10 ng/mL

低密度脂蛋白膽固醇LDL-C測定試劑盒Phospho-Numb (Ser276)  磷酸化膜相關(guān)蛋白Numb抗體規(guī)格: 0.1ml

NUP54  NUP54抗體規(guī)格: 0.2ml

Nurr1  核受體相關(guān)因子-1抗體規(guī)格: 0.1ml

OAS1  寡腺苷酸合成酶-1規(guī)格: 0.1ml

OAT-1/SLC22A6  陰離子轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白-1抗體規(guī)格: 0.1ml

OAT-1/SLC22A6  陰離子轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白-1抗體規(guī)格: 0.1ml

OAT-3  陰離子轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白-3抗體規(guī)格: 0.1ml

OAT4L/URAT1  尿酸鹽重吸收轉(zhuǎn)運(yùn)子1抗體規(guī)格: 0.2ml

Ghrelin 28  腦腸肽抗體規(guī)格: 0.1ml

OCLN/Occludin  緊密連接蛋白抗體規(guī)格: 0.1ml

Claudin 5  緊密連接蛋白5抗體規(guī)格: 0.1ml

OCT1  陽離子轉(zhuǎn)運(yùn)器1抗體規(guī)格: 0.1ml

OCT2  陽離子轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白2抗體規(guī)格: 0.1ml

注意事項(xiàng)：

①加入試劑的順序應(yīng)一致，以保證所有反應(yīng)板孔溫育的時(shí)間一樣。

②使用干凈的塑料容器配置洗滌液。

③按照說明書中標(biāo)明的時(shí)間、加液的量及順序進(jìn)行溫育操作。

④底物A應(yīng)揮發(fā)，避免長時(shí)間打開蓋子。底物B對(duì)光敏感，避免長時(shí)間暴露于光下。避免用手接觸，有毒。實(shí)驗(yàn)完成后應(yīng)立即讀取OD值。

⑤洗滌酶標(biāo)板時(shí)應(yīng)充分拍干，不要將吸水紙直接放入酶標(biāo)反應(yīng)孔中吸水。

⑥使用一次性的吸頭以免交叉污染，吸取終止液和底物A、B液時(shí)，避免使用帶金屬部分的加樣器 。

⑦實(shí)驗(yàn)中不用的板條應(yīng)立即放回包裝袋中，密封保存，以免變質(zhì)。

⑧試劑應(yīng)按標(biāo)簽說明書儲(chǔ)存，使用前恢復(fù)到室溫。稀稀過后的標(biāo)準(zhǔn)品應(yīng)丟棄，不可保存。

⑨不用的其它試劑應(yīng)包裝好或蓋好。不同批號(hào)的試劑不要混用。